УРОВЕНЬ ФАКТОРА РОСТА ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЖЕЛУДКА

ВВЕДЕНИЕ

Ангиогенез или образование новых капилляров из существующих кровеносных сосудов крайне не обходим для роста солидных опухолей и развития метастазов [1, 2]. Признано также, что образование микрососудов вокруг опухоли стимулируется разно образными ангиогенными факторами, секретируе мыми опухолевыми клетками [3]. Среди этих фак торов фактор роста эндотелия сосудов ( dothi oth to (С один из наиболее активных промоторов ангиогенеза в опу холях, в частности опухолях желудочнокишечно го тракта [2, 4, 5]. Установлена значительная кор реляция между количеством микрососудов опухо ли и экспрессией С в опухолевых клетках [4].

С является димерным, гепаринсвязанным гли копротеином, который функционирует как потен циальный митоген эндотелиальных клеток сосудов, создавая условия для их миграции и организации неоваскуляризации микроместатазов. Ссущест вует в 4х изоформах, из которых только С121 и

С165 секретируются в растворимой форме, тог

да как С189 и С206 связаны с гепаринсодер жащими протеогликанами в экстраклеточном мат риксе [4].

Кроме индукции ангиогенеза в опухолях, С выполняет и ряд других функций, способствующих опухолевой прогрессии, в частности повышает про ницаемость сосудов опухоли, индуцирует сериновые протеазы, ингибирует апоптоз эндотелиальных кле

ток и обусловливает созревание дендритных клеток (цит. по [6]. Тот факт, что рост солидных опухолей и развитие метастазов зависят от ангиогенеза, пред полагает возможное значение ангиогенных марке ров для прогноза заболевания. Повышенные уров ни растворимых форм С выявлены в сыворотке крови у больных онкологического профиля, особен но в диссеминированных стадиях. Есть данные о на личии корреляции между экспрессией С в опу холях и степенью их злокачественности, в частнос ти в злокачественных новообразованиях грудной железы [7], яичника [8], матки [9], головного моз га [10], почки и мочевого пузыря [11], толстой киш ки [12], поджелудочной железы [13], желудка [14]. Установлено также, что экспрессия С в опухо лях желудка положительно коррелирует с вовлече нием в опухолевый процесс сосудов, метастазиро ванием в лимфатические узлы и печень, а у больных с Спозитивными опухолями прогноз заболе вания хуже, чем у пациентов с Снегативными новообразованиями (цит. по [6].

Показано наличие взаимосвязи между концент рацией С в сыворотке крови и развитием мета стазов, а также неблагоприятным течением заболе вания у больных раком грудной железы [15], яични ка [16], шейки матки [17], мелкоклеточным раком легкого [18], немелкоклеточным раком легкого [19], опухолями головы и шеи [20], светлоклеточным ра ком почки [21], остеосаркомой [22], раком пищевода [23], гепатоцеллюлярной карциномой [24], колоректальным раком [25], раком поджелудочной железы

1. и раком желудка (Ж [6, 27–31]. В то же время данные о клиническом и прогностическом значении высокого уровня С в сыворотке крови больных с Ж несколько противоречивы, хотя есть инфор мация о том, что определение уровня С может быть полезно для клинического мониторинга.

   Цель исследования определение содержания

   С в сыворотке крови больных с Ж, установ ление его корреляции с клиническими характерис тиками процесса и оценка клинического значения этого показателя.

   ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

   Образцы крови больных брали после информи рования пациентов об исследовании и получения их согласия. В исследовании использован материал, полученный у пациентов с Ж, получавших лечение в Институте онкологии АМН Украины и Городской онкологической больнице Киева. Всего обследова но 138 больных (53 женщины и 85 мужчин, сред ний возраст пациентов составил 59,7 (31–80 года. По стадиям в соответствии с классификацией пациентов распределили таким образом: стадия 24 больных, 26, 57, – 31. Клиническая характеристика пациентов представлена в табл. 1.

   Периферическую венозную кровь брали ут

   ром (между 8.00 и 9.00 непосредственно перед операцией и помещали в стерильные пластиковые пробирки. Образцы крови подвергали коагуляции при комнатной температуре в течение 30 мин и по том центрифугировали при 3000 об./мин в течение 20 мин. Сыворотка сепарировалась, собиралась и со хранялась при –20 °С до анализа. Повторные забо ры крови брали на 10–12й и 30й день после опера ции. У некоторых больных заборы крови осуществ ляли через 6, 10 и 18 мес.

   Содержание С в сыворотке крови определя ли иммуноферментным методом с использованием поликлональных антител, полученных к ангиоген ному фактору, и оценкой интенсивности окраши вания на фотометре «ti («i, при длине волны 492 нм [32].

   Выживаемость больных определяли методом Kплана айера, различия между кривыми вы живаемости анализировали с помощью o тес та. Корреляционные связи оценивали помощью коэффициента Пирсона.

   РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

   Определили существенное различие между сред ними значениями уровня С в сыворотке кро ви доноров и больных с Ж: 59,5 ± 7,0 и 302,3 ± 27,8 нг/мл соответственно ( 0,001. В то же вре мя не отмечено различий между предоперацион ными уровнями С в сыворотке крови у паци ентов с Ж и клиникопатологическими показате лями (табл. 1. Отмечали тенденцию к повышению уровня С в сыворотке крови у больных с развитой стадией процесса и опухолями больших раз меров. Полученные результаты частично расходят ся с данными А. Kii и соавторов [28], ко торые показали наличие значительной корреляции между уровнем С в сыворотке крови и стадией опухолевого процесса, в частности наличием отда ленных метастазов, хотя с остальными показателя ми уровень С не коррелировал, как и в работе М. ht и соавторов [6].

   Таблица 1 Уровень ФРЭС в сыворотке крови и клинико-патологические ха-

   рактеристики больных с РЖ

   Клинико-патологические характеристики	Количество больных (138)	Уровень ФРЭС в сыворотке, нг/мл, (302, 3 (232–414))
   Локализация опухоли
   Верхняя треть	17	309,5 (265–398) 292,0 (240–408) 300,7 (232–396) 273,7 (240–345)
   Средняя треть	39
   Нижняя треть	73
   Тотальное поражение	9
   Гистология
   Аденокарцинома	97	296,2 (232–408) 292,5 (240–345) 302,5 (257–378) 313,2 (248–402)
   Слизистый рак	7
   Перстневидноклеточный рак	15
   Недифференцированный рак	19
   Степень дифференцировки
   G1	5	307,8 (245–359) 282,1 (232–325) 297,4 (240–383) 306,6 (240–408)
   G2	21
   G3	32
   G4	44
   Стадия TNM
   I	24	298,4 (245–396) 292,8 (240–402) 306,8 (240–408) 299,2 (240–414)
   II	26
   III	57
   IV	31
   Опухоль (рТ)
   Т1	12	301,2 (253–359) 287,6 (232–396) 301,3 (240–402) 306,2 (240–414)
   Т2	21
   Т3	59
   Т4	46
   Лимфатические узлы
   N0 N1-2	62 76	293,4 (232–402) 305,7 (240–414)
   Отдаленные метастазы
   Нет Есть	117 21	298,7 (232–408) 301,1 (240–414)

   Примечание: количество больных в разделе «Степень дифференцировки» составляет 102, что объясняется выполнением у 36 больных эксплоративных и симптоматических операций, при которых не выполнен полный объем гистологических исследований.

   Для определения эффекта хирургического вме шательства на уровень С в сыворотке крови, этот уровень измеряли перед операцией, на 10– 12й и 30й день после операции (всего таких боль ных 111. адикальная резекция, включавшая суб тотальную или тотальную гастрэктомию и удаление лимфатических узлов (2 выполнена 82 больным,

   у 56 пациентов выявлена нерезектабельная опухоль,

   что обусловило проведение этим пациентам пал лиативных, эксплоративных или симптоматичес ких операций. В группе радикально оперирован ных больных уровень С в сыворотке крови на 10–12й день после операции не изменялся и сни жался на 30й день ниже предоперационного уров ня в среднем на 20–35 нг/мл. У нерадикально про оперированных пациентов уровень С практи чески не изменялся.

    

   Таблица 2 Уровень ФРЭС в сыворотке крови и выживаемость больных с

   РЖ

   Уровень ФРЭС (нг/мл)	Количество продолжающих жить больных/общее число больных	Количество умерших/ общее число больных	Медиана продолжительности жизни умерших (нед)
   ≥ 290	32/59 (54,0%)	27/59 (46,0%)	33 (9–107)
   < 290	39/57 (68,5%)	18/57 (31,5%)	28 (7–72)

   Примечание: учтены больные, доступные наблюдению (116 пациентов). По рекомендации М. ht и соавторов [6] все значения уровня С в сыворотке крови разде лены на две группы: высокого уровня, показатели которого выше медианы содержания С в сыво ротке крови (> 290,0 (232–414 нг/мл и низкого показатели ниже 290,0 (232–414 нг/мл (табл. 2. Установлено, что предоперационный уровень

   С в определенной мере влияет на исход лече ния, в частности это относится к количеству умер ших и продолжающих жить больных. При этом ме диана продолжительности жизни больных обеих групп оказалась практически одинакова.

   При анализе 82 радикально оперированных боль ных выявлено: 22 пациента (26,85% умерли за пери од 2–107 нед, из них 16 (72,7% в течение первого года после оперативного вмешательства, 5 (22,8% в течение 2го, и 1 (4,5% в течение 3го. Следует отметить, что не выявлена зависимость между пре доперационным уровнем С и выживаемос тью больных, подвергнутых радикальной опера ции: из пациентов с высоким уровнем С выше 290,0 нг/мл умерло 29%, с низким 25% (рисунок. Также не установлена связь предоперационного уровня С с выживаемостью пациентов, кото рым выполнены нерадикальные операции.

    

   

    

   

    

   

   Рисунок. Общая выживаемость больных в зависимости от уровня С в сыворотке крови (р = 0,05

   Установлено, что повышение со временем уров ня С выше медианы может свидетельствовать о скрытом продолжении опухолевого процесса, в част ности рецидивировании. У больных, которым опре деляли уровень С через 6, 12 и 18 мес, этот по казатель выше медианы у 55% пациентов, из них у 65% отмечали пролонгацию опухолевого процесса в разные сроки наблюдения.

   М. ht и соавторы [6] сообщили, что при разде лении всей когорты значений уровня С на низкие и высокие (ниже и выше медианы не выявля ли корреляцию между продолжительностью безре цидивного периода с какимлибо уровнем С, но в группе больных с высоким уровнем С от мечена тенденция к более высокой частоте рециди вирования. Показано также, что высокий уровень

   С в периферической крови является независи мым прогностическим фактором, в частности фак тором риска развития метастазов [6, 27–31] и мо жет, по данным многофакторного анализа, предска зывать сниженную выживаемость [28], хотя уровни

   С в сыворотке крови не коррелировали ни с од ним из клиникопатологических показателей.

   ВЫВОДЫ

   1. Уровень С в сыворотке крови у больных с Ж значительно выше, чем у доноров.
   2. Не выявлена связь уровня С с клинико патологическими характеристиками опухолевого процесса.
   3. Уровень С выше медианы (> 290,0 нг/мл до операции может свидетельствовать о неблагопри ятном течении заболевания.
   4. Установлена определенная связь предопера ционного уровня С с выживаемостью больных, но она статистически недостоверна.
   5. Повышение уровня С в сыворотке кро ви больных после операции по отношению к после операционному уровню свидетельствует о реци дивировании и/или начале развития метастазов и может использоваться в качестве фактора мони торинга.

БЛАГОДАРНОСТЬ

Исследование выполнено при поддержке Про граммы Национальной академии наук Украины

«Особенности функционирования онкогенома (№ 0102003228.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ellis il . iоi d tti. J

1996; 32A: 2451–60.

2. Gaca G loy TD Gsch A et al. ioi o to itti to d thi tt – tt o ittio?

J 2004; 40: 1302–13.

3. Hanahan D olkman . Ptt d i h

i o th ioi ith di toii. 1996;

86: 353–64.

4. Toi atsumoto T Bano H. dothi oth

to: it ooti, diti, d thti iitio. Lt o 2001; 2: 667–73.

1. Rinmuth N Paikh AA Ahma SA et al. Bioo o io

   i i to o th toitti tt. io R Th 2003; 60: 199–207.

2. Ohta Konno H Tanaka T et al. Th iii o i

   ti dothi oth to ( oti i ti . Ltt 2003; 192: 215–25.

3. Nakamua Y Yasuoka H Tsujimoto et al. Pooti i

   ii o dothi oth to i bt io

   ith ot oo. i R 2003; 9: 716–21.

    

4. Yokoyama Y Chanock-ons DS icnc D et al.

dothi oth to i iddt ooti to i

ithi oi io. B J 2003; 88: 237–44.

9. Ua Tai Y Yamashita Y et al. otio bt

dothi oth to xio d iio ho t i i io. t J 2002; 98: 335–43.

10. Zhou Y-H Tan Hss KR Yung WKA. Th xio o PX6, PTN, dothi oth to, d id

oth to to i io. i R 2003; 9: 3369–75.

11. Bown Bs B ackman RW et al. d

xio o biit to ( dothi

oth to d it to i id d bdd io.

J Ptho 1993; 143: 1255–62.

12. Takahashi Y Kitaai Y Bucana CD et al. xio o

dothi oth to d it to, KR, o

t ith it, tti, d oitio o h o

o . R 1995; 55: 3964–8.

13. So Y Baba H ukua T et al. Hih xio o

dothi oth to i oitd ith i tti d

oo ooi o tit ith dt ti doio

. 2000; 88: 2239–45.

14. onvila C tgs P ust et al. 53 d

xio iddt dito o to d

i ooi ti tio o ti . B J

2004; 90: 206–15.

15. Сoaini D Boacchi P Daion G et al. otibtio o

dothi oth to to th Nottih ooti i dx i odti bt . B J 2001; 85: 795–7. 16. Hfl A Zilling R imm Ch et al. Poti

dothi oth to ooti t i oi . o o 2006; 103: 512–7.

1. itsuhashi A Suzuka K Yamazawa K et al.

   dothi oth to ( d t

   o i tit ith i io. 2005;

   103: 724–30.

2. Salvn P Ruotsalainn T attson K onsuu H. Hih

ttt o dothi oth to ( i oitd ith oo oto i

. t J 1998; 79: 144–6.

19. Tamua Ohta Y. dothi oth to i tit ith i o io.

2003; 98: 1217–22.

20. inta H iua K Ogino T et al. Pooti o

dothi oth to ( i hd d q

o io. B J 2000; 86: 775–81.

21. lman A Tamakin Paciotti G et al. d otti td d ot ith do thi oth to i tit ith t

. i R 2000; 6: 4628–34.

22. Kaya Waa T Kawaguchi S et al. d th

ti dothi oth to i tit ith

ii o otoo. B J 2002; 86: 864–9.

23. Shimaa Y Taka S Nabya H et al. ii iii

27. Kitamua Toi Aai K et al. ottio o

dothi oth to i th o ti tit.

o R 1998; 5: 1419–24.

1. Kaayiannakis A Syigos KN Polychoniis A et al. i

   ti i th o ti tit. o

   tio ith thooi ib, tit i, d to

   . 2002; 236: 37–42.

2. shikawa Kitayama Kazama S Nagawa H. xio o dothi oth to d ( d – i iott i to o hti tti i diti

   td ti io. J J i o 2003; 33: 21–7.

3. Konno H Ohta Baba et al. Th o o iti

L8 d oti i th oio o ti .

i 2003; 94: 735–40.

31. Kim HK Song KS Pak YS et al. td o i

ti tt ioti, , L6 d RNT i tit ith ti : oib o o ttti dito.

J 2003; 39: 184–91.

32. Лісняк І.О. Неоваскуляризація і пухлинний ріст. Дис … дра біол наук, Київ, 2004; 280 с.

o dothi oth to i oh

qo io. 2001; 92: 663–9.

24. Poon RT-P au CP-Y Chung S-T et al. Qtitti o

tio o d to xio o doth

i oth to i tit ith hto io.

R 2003; 63: 3121–6.

25. D Vita Oitua ito E et al. td io ti dothi oth to i tit ith

oo io. 2004; 100: 270–8.

26. Kaayiannakis A Bolanaki H Syigos KN et al.

dothi oth to i ti tit ot ith dd d ttti di d oo

ooi. Ltt 2003; 194: 119–24.