МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ ПРОГРЕССИРОВАНИЯ КОЛОРЕКТАЛЬНОГО РАКА

Прогрессирование опухоли, обусловленное в первую очередь неконтролируемой клеточной пролиферацией, является одним из наиболее характерных свойств злокачественных новообразований, от которого зависит прогноз, течение заболевания, а также результат лечения и выживаемость больных раком. Последние стремительные успехи в области молекулярной биологии и молекулярной клинической диагностики позволили выделить целый ряд молекулярных маркеров, наиболее часто ассоциирующихся с прогрессированием колоректального рака (КРР) [2, 25, 83]. Некоторые диагностически значимые маркеры могут быть достаточно полезными при выборе правильной тактики лечения, а также при контроле ответа опухоли на проводимое лечение [6, 8].

В настоящее время среди возможных молекулярных маркеров прогрессирования КРР выделяют: маркеры пролиферации (Ki67, PCNA), маркеры опухолевой супрессии и апоптоза (p15, p16, p18, p19, p21, p27, p53, p57, K-ras, DCC, Bcl-2), маркеры синтеза и повреждения ДНК (тимидилатсинтетаза, микросателлиты нестабильности), факторы роста и их рецепторы, маркеры инвазии и метастазирования (плазминогензависимые молекулы, матриксные металлопротеиназы, Е-кадхерин, катенины, CD44), маркеры микрометастазов (САМ 5.2 и раково-эмбриональный антиген), рецепторы стероидных гормонов [6, 18, 20, 24, 30, 58].

Пролиферативнаяактивность(ПА) являетсяодной из основных морфологических характеристик прогрессирования злокачественной опухоли. С помощью индекса пролиферации возможно прогнозирование эффективности лечения, а также развития рецидивов, отдаленных метастазов и выживаемости больных КРР [31, 58, 60]. ПА является более важным прогностическим фактором в отношении выживаемости, чем тип роста опухоли или количество метастазов [17, 55, 75]. Диагностически значимым маркером при определения ПА недавно признан антиген Ki-67 [6]. Ki-67 экспрессируется у 33% больных КРР, кроме того, его экспрессия положительно коррелирует с эффективностью проведения химиолучевой терапии [34, 78]. Следует отметить, что в случае высокого уровня экспрессии Ki-67 5-летняя безрецидивная выживаемость

после химиолучевого лечения отмечена у 91% больных КРР, в случае низкого уровня — у 34% [60]. H.J. Choi и соавторы [17] доказали, что рецидивы КРР возникают значительно чаще в группе больных с высоким индексом пролиферации в первичной опухоли (ПО). По данным M. Nakamura и соавторов [47] ПА свыше 50% в ПО больных КРР является неблагоприятным прогностическим признаком.

Важным ферментом синтеза ДНК является тимидилатсинтетаза (ТС) [7, 22], при повышении уровня экспрессии которой возрастает ПА клеток КРР. Высокий уровень экспрессии ТС в ПО определяется в среднем у 70–72% больных КРР [9, 22]. ТС является мишенью для флуороурацила, который широко используют в химиотерапии КРР, поэтому внутриклеточная концентрация ТС также может быть индикатором клинического эффекта проводимой химиотерапии с использованием флуороурацила [9, 14, 22, 70]. Кроме того, уровень ТС является прогностическим фактором в отношении рецидивов и метастазов, а также безрецидивной и общей выживаемости больных КРР. Для пациентов с низким уровнем экспрессии ТС характерен более благоприятный прогноз по сравнению с таковым у пациентов, у которых отмечен высокий уровень экспрессии этого маркера [9, 22].

Одним из основных регуляторов клеточного цикла является опухолевый супрессор р53, экспрессирующийся у 39,0–62,1% ПО больных КРР. Оценка экспрессииp53 дает возможность прогнозировать эффективность лечения больных КРР [61, 84]. По данным многих авторов гиперэкспрессия р53 ассоциируется с высоким риском развития местных рецидивов, отдаленного метастазирования и низкой выживаемостью [65–67, 84]. М. Diez и соавторы [21] установили, что при экспрессии p53 в ПО больных КРР значительно возрастает риск возникновения рецидива, а 5-летняя безрецидивная выживаемость значительно уменьшается и составляет около 38%. При отсутствии экспрессииp53 в ПОбольных КРР отмечают низкий риск возникновения рецидива и достаточно высокую 5-летнюю выживаемость — 75% [21].

Однако существует и другое мнение в отношении прогностического значения Ki-67, ТС и р53. В ряде работ приведены данные об отсутствии прогности-

ческого значения этих маркеров у больных КРР [7, 14, 22, 23, 60, 62, 77].

Важную роль в регуляции экспрессии р53 играют белки p21 и р27, которые являются одними из основных ингибиторов циклинзависимых киназ. Так, p21 экспрессируется в клетках ПОу 33–67% больных КРР [84, 88] и чем ниже уровень экспрессии p21 в опухолевых клетках до предоперационного химиолучевого лечения, тем лучше отдаленные результаты лечения [60, 84]. О. Schwandner и соавторы [66] в исследовании с участием 97 неоперированных больных КРР установили, что экспрессия p21 связана с частотой развития метастазов и выживаемостью этих больных. Доказано, что безрецидивная выживаемость лучше у больных с низким уровнем экспрессии р21 [64], по данным других авторов при уровне экспрессии р21 в клетках ПО более 50% у больных КРР отмечается достаточно благоприятный прогноз в отношении выживаемости [26, 54, 88].

Экспрессия р27 в аденокарциноме толстой кишки и нормальной слизистой оболочке кишечника определяется в 40–54 и 80% пациентов соответственно [39, 48]. Т. Noguchi и соавторы [48] установили, что экспрессия р27 в ПО больных КРР является независимым благоприятным прогностическим признаком в отношении общей выживаемости. Прир27+-опухолях 5-летняя выживаемость больных КРР после радикального лечения составила 80,7%, тогда как при р27– опухолях — всего лишь 49,3% [48]. Некоторые авторы отмечают, что снижение экспресии р27 в ПО больных КРР менее чем до 50% является неблагоприятным прогностическим признаком [42, 53, 56, 85]. По данным H.G. Moore и соавторов [45] экспрессия р27 в ПО влияет на эффективность химиолучевого лечения у больных с местнораспространенным КРР, безрецидивная выживаемость таких больных после лечения была лучше в группе пациентов без экспрессии р27 до начала проведения терапии.

У больных с метастатическим КРР экспрессия р21 и р27 в ПО является неблагоприятным прогностическим признаком. При отсутствии экспрессии этих маркеров в ПО медиана выживаемости больных с метастатическим КРР составила 22 мес, тогда как при экспрессии в ПО одного из маркеров — 15 мес, а обоих маркеров — всего лишь 10 мес [16]. Однако следует отметить, что некоторые исследователи вообще не выявили прогностического значения экспрессии р27 у больных КРР [40, 79].

Цитоплазматический протеин bcl-2 является одним из ингибиторов апоптоза. Экспрессия bcl-2 определяется у 29–53% ПО больных КРР. Показано, что при увеличении размеров опухоли экспрессия bcl-2 возрастает [28, 65–67]. Высокий уровень экспрессии bcl-2 у больных КРР II стадии ассоциируется с высокой 5-летней выживаемостью (до 98%), а также низким риском развития рецидивов. При низком уровне экспрессии bcl-2 в ПО 5-летняя выживаемость больных КРР снижается до 70%, при этом также повышается риск возникновения рецидивов

[67, 44]. По данным М. Ilyas и соавторов [28] высокий уровень экспрессии bcl-2 отмечался у 33% ПО больных с рецидивом КРР, тогда как в группе больных КРР без рецидива — у 69% [28]. Однако некоторые авторы не установили связи между реакцией опухоли на химиолучевую терапию, выживаемостью больных КРР и уровнем экспрессии bcl-2 в клетках КРР [7, 23, 62].

Матриксные металлопротеиназы (ММП) играют важную роль в прогрессировании КРР [37, 46, 73, 87], участвуя в разрушении экстрацеллюлярного матрикса, ангиогенезе опухоли; они также взаимодействуют с факторами роста и их рецепторами, медиаторами апоптоза и молекулами клеточной адгезии [38, 71]. Обнаружен более высокий уровень экспрессии ММП в плазме крови и клетках ПО больных КРР по сравнению с таковыми в плазме крови здоровых лиц и в нормальной слизистой оболочке кишечника [10, 37]. Экспрессия ММП-2 определяется в ПО 68,8% больных КРР [80]. Некоторые авторы установили, что уровень ММП в плазме крови и ПО у больных КРР коррелирует с метастатической активностью и инвазией опухоли в окружающие ткани, а также стадией КРР и клиническим прогнозом. Уровень экспрессии ММП-2 в ПО у больных КРР с метастазами в печени составил 24,1 ± 2,5, тогда как при отсутствии метастазов — 11,4 ± 1,3. В группе больных КРР с высоким уровнем экспрессии ММП в ПО метастазы в печени определяли у 30%, а в группе больных КРР с низким уровнем экспрессии ММП в ПО — только у 14% [33, 37, 50, 51, 73, 87].

Важным маркером прогрессирования злокачественного процесса может быть нарушение адгезии между клетками. Одними из основных молекул, обеспечивающих прочность адгезивных связей, являются Е-кадхерин и протеогликан CD44 [6], снижение уровня экспрессии которых в ПО больных КРР связывают с повышенным риском развития метастазов и неблагоприятным прогнозом [4, 29].

Факторы роста (эпидермальный фактор роста, трансформирующий фактор роста-альфа, амфирегулин, гепарин-связывающий фактор роста, херегулин и бетацеллюлин), а также рецепторы к эпидермальному (ErbB1/HER1, ErbB2/HER2, ErbB3/ HER3, ErbB4/HER4) и инсулиноподобным (IGFR) факторам роста влияют на рост и регенерацию слизистой оболочки кишечника, а также могут быть непосредственно связаны с прогрессированием КРР [5, 35, 47, 68]. Экспрессия ErbB1/HER1, ErbB2/ HER2, ErbB3/HER3, ErbB4/HER4 у больных КРР составляет 43–50, 17–83, 34–89 и 18% соответственно. Гиперэкспрессию erbB1 определяют у больных КРР III–IV стадии, с низкой степенью дифференцировки, сосудистой инвазией опухоли. У боль­ ных КРР с высоким уровнем экспрессии erbB2 и erbB4 в ПО отмечают неблагоприятный прогноз в отношении выживаемости [43].

В последние годы изучают влияние экспрессии фермента циклооксигеназы-2 (COX-2) на прогрес-

сирование КРР. Установлено, что COX-2 влияет на неоангиогенез опухоли и отдаленное метастазирование у больных КРР. Существует мнение, что уровень экспрессии COX-2 может коррелировать со стадией КРР, но для определения прогностического значения экспрессии COX-2 необходимы дальнейшие исследования [13, 83].

Опубликовано значительное количество работ, посвященных влиянию оксида азота (NO), а также ферментов его синтеза на развитие и прогрессирование КРР [12, 18, 32, 49, 59, 82]. Экспрессия iNOS в ПО отмечается у 20–50% больных КРР [18], однако имеющиеся данные о возможном влиянии экспрессии iNOS на прогноз у больных КРР весьма противоречивы. Согласно результатам ряда исследований при экспрессии iNOS в ПО метастазы в лимфатические узлы обнаруживают у 63% больных КРР, а при отсутствии таковой — у 30% [49, 18, 81]. Другие исследователи не выявили прогностического значения iNOS [36, 63].

Современные эпидемиологические, экспериментальные и клинические данные подтверждают гипотезу о влиянии эстрогенов на развитие и прогрессирование КРР [20]. Экспрессию рецепторов эстрогенов (РЭ) определяют у 60–91% больных КРР, тогда как в нормальной слизистой оболочке кишечника — всего в 30% случаев [52]. Полученные данные свидетельствуют, что экспрессия РЭ в ПО положительно коррелирует с благоприятным течением заболевания и выживаемостью больных КРР [1, 57].

Белок pS2, имеющий важное прогностическое значение при раке молочной железы, также экспрессируется у 89% больных КРР, при этом в опухоли определяется достоверно более высокий уровень pS2, чем в нормальной слизистой оболочке кишечника. Уровень экспрессии pS2 намного выше в дистально расположенных опухолях ободочной кишки, а также опухолях прямой кишки. По данным ряда авторов pS2 играет роль в канцерогенезе КРР, но достоверного прогностического значения этого маркера не установлено [41, 72, 76].

Белок nm23 является одним из маркеров клеточной пролиферации, дифференцировки и контроля метастазирования опухоли [3]. Ряд исследователей доказали, что экспрессия nm23 в ПО больных КРР является благоприятным прогностическим фактором [57, 86]. P.Y. Cheah и соавторы [15] отмечают, что экспрессия nm23 в ПО у больных КРР, напротив, коррелирует с риском развития метастазов и неблагоприятным прогнозом. В.В. Делекторская и соавторы [3], а также С.R. Berney и соавторы [11] указывают, что экспрессия nm23 является независимым прогностическим фактором развития отдаленных метастазов и выживаемости больных КРР. Несмотря на это, некоторые исследователи не отметили прогностической роли nm23 [19, 69].

Одними из основных белков, защищающих клетку от повреждающих факторов, являются белки теплового шока, уровень которых в аденокарциноме

толстой кишки выше, чем в нормальной слизистой оболочке кишечника. Исследования, посвященные определению прогностической роли белков теплового шока, немногочисленны и требуют продолжения работы в данном направлении [27]. В последнее время также проводятся исследования по изучению влияния повреждения хромосом на прогрессирование КРР. Т. Watanabe и соавторы [74] установили, что наличие хромосомных повреждений (8p, 17q, 18q) у больных КРР может быть связано с неблагоприятным прогнозом.

Таким образом, на сегодняшний день существует достаточно много молекулярных маркеров прогрессирования КРР, уровень экспрессии которых зачастую может ассоциироваться с высоким риском развития рецидивов или отдаленного метастазирования, а также позволяют мониторировать результаты проведенного лечения и в некоторых случаях даже прогнозировать выживаемость больных КРР. Однако, несмотря на многообразие молекулярных маркеров, свидетельствующих о прогрессировании опухолевого процесса, представляется целесообразным дальнейшее изучение диагностической значимости существующих и поиск новых маркеров, имеющих прогностическое значение при КРР.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бассалык ЛС, Короткова ТВ, Пророков ВВ и др. Прогностическое значение уровня рецепторов стероидных гормонов при раке толстой кишки. Вопр онкол 1987; 9: 43–6.

2. Голдобенко ГВ, Канаев СВ. Факторы прогноза и возможность индивидуализации лучевого лечения онкологических больных. Вопр онкол 2000; 46 (3): 361–5.

3. Делекторская ВВ, Перевощиков АГ, Кушлинский НЕ. Экспрессиябелковnm23 иc-ERBB-2 в клетках первичного колоректального рака и его метастазов. Архив патол 2003; 5: 6–11.

4. Корсакова НА. Особенности экспрессии Е-кадхерина, муцина-2 и Ki-67 в аденокарциномах толстой кишки. Архив патол 2003; 5: 15–7.

5. Моисеенко АБ, Берштейн ЛМ. Инсулиноподобный фактор роста 1, связывающий его белок (BP-3) и инсулин при колоректальном раке. Вопр онкол 2001; 47 (4): 383–6.

6. Пожарисский КМ, Леенман ЕЕ. Значение иммуногистохимических методик для определения характера лечения и прогноза опухолевых заболеваний. Архив патол 2000; 5: 3–11.

7. Allegra CJ, Parr AL, Wold LE. Investigation of the prognos- tic and predictive value of thymidylate synthase, p53, and Ki-67 in patients with locally advanced colon cancer. J Clin Oncol 2002; 20 (1): 1735–43.

8. Allred DC, Harvey JM, Berardo M, et al. Prognostic and pre­dictive­ factors in bre­ast cance­r by immunohistoche­mical analy­ sis. Mod Pathol 1998; 11 (2): 155–68.

9. Aschele C, Debernardis D, Bandelloni R, et al. Thymidyl­ ate­ synthase­ prote­in e­xpre­ssion in colore­ctal cance­r me­tastase­s pre­­ dicts for clinical outcome­ to le­ucovorin­modulate­d bolus or infusio­ nal 5­fluorouracil but not me­thotre­xate­­modulate­d bolus 5­fluorou­ racil. Ann Oncol 2002; 13 (12): 1882–92.

10. Baker EA, Leaper DJ. The­ plasminoge­n activator and ma­ trix me­talloprote­inase­ syste­ms in colore­ctal cance­r: re­lationship to tumour pathology. Eur J Cance­r 2003; 39 (7): 981–8.

11. Berney CR, Fisher RJ, Yang J, et al. Prote­in marke­rs in colore­ctal cance­r: pre­dictors of live­r me­tastasis. Ann Surg 1999; 230 (2): 179–84.

12. Bing RJ, Miyataka M, Rich KA. Nitric oxide, prostanoids, cyclooxygenase, and angiogenesis in colon and breast cancer. Clin Cancer Res 2001; 7: 3385–92.

13. Brown WA, Skinner SA, Malcontenti-Wilson C, et al. Non- steroidal anti-inflammatory drugs with activity against either cyclooxygenase 1 or cyclooxygenase 2 inhibit colorectal cancer in a DMH rodent model by inducing apoptosis and inhibiting cell proliferation. Gut 2001; 48: 660–6.

14. Cascinu S, Georgoulias V, Kerr D, et al. Colore­ctal cance­r in the adjuvant setting: perspectives on treatment and the role of prognostic factors. Ann Oncol 2003; 14: 25–9.

15. Cheah PY, Cao X, Eu KW, et al. NM23-H1 immunostai- ning is inversely associated with tumour staging but not overall sur- vival or disease recurrence in colorectal carcinomas. Br J Cancer 1998; 77 (7): 1164–8.

16. Cheng JD, Werness BA, Babb JS, et al. Paradoxical cor- relation of cyclin-dependent kinase inhibitors p21 waf1/cip1 and 27kip1 in metastatic colorectal carcinoma. Clin Cancer Research 1999; 5: 1057–62.

17. Choi HJ, Jung IK, Kim SS, Hong SH. Proliferating cell nuclear antigenexpression and its relationship tomalignancypotentia lininvasive colorectal carcinomas. Dis Colon Rectum 1997; 40 (1): 51–5.

18. Cianchi F, Palomba A, Messerini L, etal. Tumor angiogenesisin lymphnode-negative rectal cancer: correlation with clinicopathological parameters and prognosis. Ann Surg Oncol 2002; 9 (1): 20–6.

19. Crowe PJ, Yang JL, Berney CR, et al. Ge­ne­tic marke­rs of survival and live­r re­curre­nce­ afte­r re­se­ction of live­r me­tastase­s from colore­ctal cance­r. World J Surg 2001; 25 (8): 996–1001.

20. Di Leo A, Messa C, Cavallini A, et al. Estrogens and colo- rectal cancer. Curr Drug Targets Immune Endocr Metabol Disord 2001; 1 (1): 1–12.

21. Diez M, Medrano M, Muguerza JM, et al. Influe­nce­ of tu­ mor localization on the­ prognostic value­ of P53 prote­in in colore­ctal ade­nocarcinomas. Anticance­r Res 2000; 20 (5): 3907–12.

22. Elder D, Hallstrom M, Johston PG. Thymidylate synthase expression: an independent prognostic factor for local recurrence, distant metastasis, disease-free and overall survival in rectal cancer. Clin Cancer Res 2000; 6: 1378–84.

23. Fernebro E, Bendahl PO, Dictor M, et al. Immunohistoche­­ mical patte­rns in re­ctal cance­r: application of tissue­ microarray with prognostic corre­lations. Int J Cance­r 2004; 111 (6): 921–8.

24. Graziano F, Cascinu S. Prognostic mole­cular marke­rs for planning adjuvant che­mothe­rapy trials in Duke­s’B colore­ctal cance­r pati­ e­nts: how much e­vide­nce­ is e­nough? Ann Oncol 2003; 14: 1026–38.

25. Hasebe T, Morihiro M, Sasaki S, et al. Tumor thickne­ss is a histopathologic pre­dictive­ parame­te­r of tumor me­tastasis and pro­ gnosis in patie­nts with Duke­s stage­ C ulce­rative­­type­ colore­ctal carci­ noma. A two­hospital­base­d study. Cance­r 2000; 89 (1): 35–45.

26. Holland TA, Elder J, McCloud JM, et al. Hoban Subcellu- lar localisation of cyclin D1 protein in colorectal tumours is asso- ciated with p21(WAF1/CIP1) expression and correlates with patient survival. Int J Cancer 2001; 95 (5): 302–6.

27. Hwang TS, Han HS, Choi HK, et al. Differential, stage- dependent expression of Hsp70, Hsp110 and Bcl-2 in colorectal cancer. J Gastroenterol Hepatol 2003; 18: 690–700.

28. Ilyas M, Hao X-P, Wilkinson K, et al. Loss of Bcl-2 expres- sion correlates with tumor recurrence in colorectal cancer. Gut 1998; 43: 383–7.

29. Ioachim EE, Goussia AC, Machera M, et al. Immunohis- tochemical evaluation of cathepsin D expression in colorectal tu- mours: a correlation with extracellular matrix components, p53, pRb, bcl-2, c-erbB-2, EGFR and proliferation indices. Anticancer Res 1999; 19 (3A): 2147–55.

30. Isaka N, Nozue M, Doy M. Prognostic significance of perirectal lymph node micrometastases in Dukes’ B rectal carcinoma: an immunohistochemical study by CAM5.2. Clin Cancer Res 1999; 5: 2065–8.

31. Ishida H, Miwa H, Tatsuta M, et al. Ki­67 and CEA e­xpre­s­ sion as prognostic marke­rs in Duke­s’ C colore­ctal cance­r. Cance­r Lett 2004; 207 (1): 109–15.

32. Jaiswal M, LaRusso NF, Gores GJ. Nitric oxide in gastrointes- tinalepi the lislcell carcinogenesis: linkingin flammation to oncogenesis. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2001; 281: 626–34.

33. Kikuchi R, Noguchi T, Takeno S, et al. Immunohistoche­mical de­te­ction of me­mbrane­­type­­1­matrix me­talloprote­inase­ in colore­ctal carcinoma. Br J Cance­r 2000; 83 (2): 215–8.

34. Kim NK, Park JK, Lee KY, et al. p53, Bcl-2, and Ki-67 expression according to tumor response after concurrent chemo- radiotherapy for advanced rectal cancer. Ann Surg Oncol 2001; 8 (5): 418–24.

35. Kopp R, Rothbauer E, Mueller E, et al. Re­duce­d survival of re­ctal cance­r patie­nts with incre­ase­d tumor e­pide­rmal growth factor re­ce­ptor le­ve­ls. Dis Colon Rectum 2003; 46 (10): 1391–9.

36. Lagares-Garcia JA, Moore RA, Collier B, et al. Nitric oxi- de synthase as a marker in colorectal carcinoma. Am Surg 2001; 67 (7): 709–13.

37. Langenskiold M, Holmdahl L, Falk P, et al. Incre­ase­d plas­ ma MMP­2 prote­in e­xpre­ssion in lymph node­­positive­ patie­nts with colore­ctal cance­r. Int J Colore­ctal Dis 2005; 20 (3): 245–52.

38. Leeman MF, Curran S, Murray GI. Ne­w insights into the­ role­s of matrix me­talloprote­inase­s in colore­ctal cance­r de­ve­lopme­nt and progre­ssion. J Pathol 2003; 201 (4): 528–34.

39. Li GQ, Zhang HF. Mad2 and p27 e­xpre­ssion profile­s in colore­ctal cance­r and its clinical significance­. World J Gastroente- rol 2004; 10 (21): 3218–20.

40. Lim YJ, Kim YH, Ahn GH, et al. Cyclin E, p27 and mutant p53 do not pre­dict the­ prognosis in AJCC stage­ II colore­ctal carcino­ mas. Korean J Gastroenterol 2004; 44 (6): 314–20.

41. Luqmani YA, Ryall G, Shousha S, et al. An immunohisto- chemical survey of pS2 expression in human epithelial cancers. Int J Cancer 1992; 50 (2): 302–4.

42. Manne U, Jhala NC, Jones J, et al. Prognostic significance of p27kip-1 expression in colorectal adenocarcinomas is associated with tumor stage. Clin Cancer Res 2004; 10: 1743–52.

43. Maurer CA, Friess H, Kretschmann B, et al. Increased expres- sion of erbB3 in colorectal cancer is associated with concomitant in- crease in the level of erbB2. Hum Pathol 1998; 29 (8): 771–7.

44. Meterissian SH, Kontogiannea M, Al-Sowaidi M, et al. Bcl-2 is a useful prognostic marker in dukes’ B colon cancer. Ann Surg Oncol 2001; 8 (6): 533–7.

45. Moore HG, Shia J, Klimstra DS, et al. Expression of p27 in residual rectal cancer after preoperative chemoradiation predicts long-term outcome. Ann Surg Oncol 2004; 11: 955–61.

46. Mysliwiec AG, Ornstein DL. Matrix me­talloprote­inase­s in colore­ctal cance­r. Clin Colore­ctal Cance­r 2002; 1 (4): 208–19.

47. Nakamura M, Miyamoto S, Maeda H, et al. Low le­ve­ls of insulin­like­ growth factor type­ 1 re­ce­ptor e­xpre­ssion at cance­r ce­ll me­mbrane­ pre­dict live­r me­tastasis in Duke­s’ C human colore­ctal can­ ce­rs. Clin Cancer Res 2004; 10 (24): 8434–41.

48. Noguchi T, Kikuchi R, Ono K, et al. Prognostic significan­ ce­ of p27/kip1 and apoptosis in patie­nts with colore­ctal carcinoma. Oncol Rep 2003; 10 (4): 827–31.

49. Nozoe T, Yasuda M, Honda M, at al. Immunohistohem- ical expression of cytokine induced nitric oxide synthase in colo- rectal carcinoma. Oncol Rep 2002; 9: 521–4.

50. Oberg A, Hoyhtya M, Tavelin B, et al. Limite­d value­ of pre­­ ope­rative­ se­rum analyse­s of matrix me­talloprote­inase­s (MMP­2, MMP­9) and tissue­ inhibitors of matrix me­talloprote­inase­s (TIMP­1, TIMP­2) in colore­ctal cance­r. Anticance­r Res 2000; 20 (2B): 1085–91.

51. Okada N, Ishida H, Murata N, etal. Matrixme­talloprote­inase­­ 2 and ­9 in bile­ as a marke­r of live­r me­tastasis in colore­ctal cance­r. Biochem Biophys Res Commun 2001; 288 (1): 212–6.

52. Oshima CT, Wonraht DR, Catarino RM, et al. Estrogen and progesterone receptors in gastric and colorectal cancer. Hepato- gastroenterology 1999; 46 (30): 3155–8.

53. Palmqvist R, Stenling R, Oberg A, et al. Prognostic significance­ of p27(Kip1) e­xpre­ssion in colore­ctal cance­r: a clinico­ pathological characte­rization. J Pathol 1999; 188 (1): 18–23.

54. Pasz-Walczak G, Kordek R, Faflik M. P21 (WAF1) expres- sion in colorectal cancer: correlation with P53 and cyclin D1 exp- ression, clinicopathological parameters and prognosis. Pathol Res Pract. 2001; 197 (10): 683–9.

55. Petrowsky H, Sturm I, Graubitz O, et al. Relevance of Ki-67 antigen expression and K-ras mutation in colorectal liver metasta- ses. Eur J Surg Oncol 2001; 27 (1): 80–7.

56. Prall F, Ostwald C, Nizze H, et al. Expre­ssion profiling of colore­ctal carcinomas using tissue­ microarrays: ce­ll cycle­ re­gulato­ ry prote­ins p21, p27, and p53 as immunohistoche­mical prognostic marke­rs in univariate­ and multivariate­ analysis. Appl Immunohisto- chem Mol Morphol 2004; 12 (2): 111–21.

57. Qin Z, Wan D, Lian J, et al. Expression of nm23 protein and estrogen receptor and prognosis of colorectal cancers. Zhon- ghua Wai Ke Za Zhi 2000; 38 (7): 514–6.

58. Qiu H, Sirivongs P, Rothenberger M, et al. Mole­cular pro­ gnostic factors in re­ctal cance­r tre­ate­d by radiation and surge­ry. Dis Colon Rectum 2000; 43 (4): 451–9.

59. Rao CV, Indranie C, Simi B, et al. Chemopreventive properties of a selective in duciblenit ricoxidesyn thase in hibitorin colon carcinogenesis, administered alone or in combination with celecoxib, a selec- tive cyclooxygenase-2 inhibitor. Cancer Res 2002; 62: 165–70.

60. Rau B, Sturm I, Lage H, et al. Dynamic expression pro- file of p21WAF1/CIP1 and Ki-67 predicts survival in rectal carcinoma treated with preoperative radiochemotherapy. J Clin Oncol 2003; 21 (18): 3391–401.

61. Rebischung C, Gerard JP, Gayet J, et al. Prognostic value­ of P53 mutations in re­ctal carcinoma. Int J Cance­r 2002; 10 (2): 131–5.

62. Reerink O, Karrenbeld A, Plukker JT, etal. Mole­cular progno­ stic factors in locally irre­se­ctable­ re­ctal cance­r tre­ate­d pre­ope­rative­ly by che­mo­radiothe­rapy. Anticance­r Res. 2004; 24 (2C): 1217–21.

63. Ropponen KM, Kellokoski JK, Lipponen PK, et al. Expression of inducible nitric oxide synthase in colorectal cancer and its associ- ation with prognosis. Scand J Gastroenterol 2000; 35: 1204–11.

64. Ropponen KM, Kellokoski JK, Lipponen PK, et al. p22/WAF1 expression in human colorectal carcinoma: association with p53, transcription factor AP-2 and prognosis. Br J Cancer 1999; 81 (1): 133–40.

65. Sarela AI, Scott N, Ramsdale J, et al. Immunohistochemical detection of the anti-apoptosis protein, surviving, predicts survival after curative resection of stage II colorectal carcinomas. Ann Surg Oncol 2001; 8: 305–10.

66. Schwandner O, Bruch HP, Broll R. Prognostic significance­ of p21 and p27 prote­in, apoptosis, clinical and histologic factors in re­ctal cance­r without lymph node­ me­tastase­s. Eur Surg Res 2002; 34 (6): 389–96.

67. Sinicrope FA, Hart J, Hsu H-A, et al. Apoptotic and mitotic indices predict survival rates in lymph node-negative colon carcinomas. Clin Cancer Res 1999; 5: 1793–1804.

68. Spano J-P, Atlan D, Lagorce C. Corralation of EGFR ex- pression and other tumor characteristics in colorectal cancer out- come and prognosis. Ann Onc 2002; 13: 72–9.

69. Tabuchi Y, Nakamura T, Kuniyasu T, et al. Expre­ssion of nm23­H1 in colore­ctal cance­r: no association with me­tastase­s, histo­

1. Wagenaar-Miller RA, Gorden L, Matrisian LM. Matrix me­talloprote­inase­s in colore­ctal cance­r: is it worth talking about? Cance­r Me­tastasis Re­v 2004; 23 (1–2): 119–35.

2. Watanabe T, Tsung-Teh Wu, Catalano PJ. Molecular pre- dictors of survival after adjuvant chemotherapy for colon cancer. N Engl J Med 2001; 344 (16): 1196–206.

3. Weber JC, Nakano H, Bachellier P, etal. Is a proliferation index of cancer cell sareliable prognostic factor after hepatectomy in patients with colorectal liver metastases? Am J Surg 2001; 182 (1): 81–8.

4. Welter C, Theisinger B, Rio MC, et al. Expression pattern of breast-cancer-associated protein pS2/BCEI in colorectal tumors. Int J Cancer 1994; 56 (1): 52–5.

5. Wiggenraad R, Tamminga R, Blok P, et al. The prognostic significance of p53 expression for survival and local control in rec- tal carcinoma treated with surgery and postoperative radiotherapy. Int J Radiat Oncol Biol Phys 1998; 41 (1): 29–35.

6. Willett CG, Warland G, Hagan MP, et al. Tumor prolife- ration in rectal cancer following preoperative irradiation. J Clin Oncol 1995; 13: 1417–24.

7. Wu JT, Kakar S, Nelson RL, et al. Prognostic significance­ of DCC and p27Kip1 in colore­ctal cance­r. Appl Immunohistochem Mol Morphol 2005; 13 (1): 45–54.

8. Xiong B, Sun TJ, Hu WD, etal. Expre­ssionofcyclooxyge­nase­­ 2 in colore­ctal cance­r and its clinical significance­. World J Gastroe­nte­rol 2005; 11 (8): 1105–8.

9. Xu MH, Deng CS, Zhu YQ, et al. Role of inducible nitric oxide synthase expression in aberrant crypt foci-adenoma-carci- noma sequence. World J Gastroenterol 2003; 9 (6): 1246–50.

10. Yagihashi N, Kasajima H, Sugai S, et al. Increased in situ expression of nitric oxide synthase in human colorectal cancer. Vir- chows Arch 2000; 436 (2): 109–14.

11. Yamac D, Celnkoglu G, Akyurek N. Prognostic significance of COX-2 expression in colorectal carcinoma. Ann Onc 2002; 13: 74–8.

12. Yoshikawa R, Yanagi H, Kusunoki M, et al. Prognostic value­s of radiation­induce­d p53 inadjace­nt normalmucosaandp21WAF1/CIP1 e­x­ pre­ssion in re­ctal cance­r patie­nts. Int J Oncol 2002; 21 (6): 1223–8.

13. Zhang H, Sun XF. Loss of p27 e­xpre­ssion pre­dicts poor pro­ gnosis in patie­nts with Duke­s’ B stage­ or proximal colore­ctal cance­r. Int J Oncol 2001; 19 (1): 49–52.

14. Zhang JB, Chen L, Han F, et al. Ove­re­xpre­ssion of c­e­rbB­2 and hypoe­xpre­ssion of nm23 re­lating to poor prognosis of colore­ctal carcinoma. Zhonghua Bing Li Xue Za Zhi 2003; 32 (2): 115–9.

15. Zinzindohoué F, Lecomte T, Ferraz J-M, et al. Prognostic significance of MMP-1 and MMP-3 functional promoter polymor- phisms in colore­ctal cance­r. Clin Cance­r Res 2005; 11: 594–9.

16. Zirbes TK, Baldus SE, Moenig SP, et al. Prognostic impact of p21/waf1/cip1 in colorectal cancer. Int J Cancer 2000; 89 (1): 14–8.

    logical stage­, or survival. Surg Today 1999; 29 (2): 116–20.

    1. Triest B, Pinedo HM, Blaauwgeers LG. Prognostic role of thymidylate synthase, thymidine phosphorylase/platelet-derived endothelial cell growth factor, and proliferation markers in colo- rectal cancer. Clin Cancer Res 2000; 6: 1063–72.

    2. Tutton MG, George ML, Eccles SA, et al. Use­ of plasma MMP­2 and MMP­9 le­ve­ls as a surrogate­ for tumour e­xpre­ssion in colore­ctal cance­r patie­nts. Int J Cance­r 2003; 107 (4): 541–50.

    3. Vizoso FJ, Fagilde MC, Corte MD, et al. Cytosolic levels of an estrogen-induced breast cancer-associated peptide (TFF1/pS2) in colorectal cancer: clinical significance and relationship with ste- roid receptors. Int J Biol Markers 2003; 18 (4): 301–10.