УРОВЕНЬ ФАКТОРА РОСТА ЭНДОТЕЛИЯ СОСУДОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ РАКОМ ЖЕЛУДКА

Лисняк И.А., Меренцев С.П.

Фактор роста эндотелия сосудов (ФРЭС) обеспечивает васкуляризацию ткани, в частности опухолевой, что необходимо для прогрессирования заболевания. Цель исследования — определение уровня ФРЭС в сыворотке крови больных раком желудка (РЖ) и оценка его связи с клиническими характеристиками, так как литературные данные противоречивы. Уровень ФРЭС определяли иммуноферментным методом у 138 пациентов с РЖ (1-4 стадия), подвергнутых оперативному вмешательству. Уровень ФРЭС в сыворотке крови пациентов с РЖ значительно выше, чем у доноров. Не выявлена связь уровня ФРЭС с клинико-патологическими характеристиками опухолевого процесса. Установлено, что содержание ФРЭС в сыворотке крови выше медианы (> 290,0 нг/мл) до операции может свидетельствовать о неблагоприятном течении заболевания. Повышение уровня ФРЭС через определенное время после операции по отношению к послеоперационному уровню свидетельствует о рецидивировании и/или начале развития метастазов. Контроль изменений уровня ФРЭС в сыворотке крови после операции можно использовать для мониторинга больных с РЖ с целью раннего выявления начала прогрессирования процесса.


ВВЕДЕНИЕ

Ангиогенез или образование новых капилляров из существующих кровеносных сосудов крайне не обходим для роста солидных опухолей и развития метастазов [1, 2]. Признано также, что образование микрососудов вокруг опухоли стимулируется разно образными ангиогенными факторами, секретируе мыми опухолевыми клетками [3]. Среди этих фак торов фактор роста эндотелия сосудов ( dothi oth to (С один из наиболее активных промоторов ангиогенеза в опу холях, в частности опухолях желудочнокишечно го тракта [2, 4, 5]. Установлена значительная кор реляция между количеством микрососудов опухо ли и экспрессией С в опухолевых клетках [4].

С является димерным, гепаринсвязанным гли копротеином, который функционирует как потен циальный митоген эндотелиальных клеток сосудов, создавая условия для их миграции и организации неоваскуляризации микроместатазов. Ссущест вует в 4х изоформах, из которых только С121 и

С165 секретируются в растворимой форме, тог

да как С189 и С206 связаны с гепаринсодер жащими протеогликанами в экстраклеточном мат риксе [4].

Кроме индукции ангиогенеза в опухолях, С выполняет и ряд других функций, способствующих опухолевой прогрессии, в частности повышает про ницаемость сосудов опухоли, индуцирует сериновые протеазы, ингибирует апоптоз эндотелиальных кле

ток и обусловливает созревание дендритных клеток (цит. по [6]. Тот факт, что рост солидных опухолей и развитие метастазов зависят от ангиогенеза, пред полагает возможное значение ангиогенных марке ров для прогноза заболевания. Повышенные уров ни растворимых форм С выявлены в сыворотке крови у больных онкологического профиля, особен но в диссеминированных стадиях. Есть данные о на личии корреляции между экспрессией С в опу холях и степенью их злокачественности, в частнос ти в злокачественных новообразованиях грудной железы [7], яичника [8], матки [9], головного моз га [10], почки и мочевого пузыря [11], толстой киш ки [12], поджелудочной железы [13], желудка [14]. Установлено также, что экспрессия С в опухо лях желудка положительно коррелирует с вовлече нием в опухолевый процесс сосудов, метастазиро ванием в лимфатические узлы и печень, а у больных с Спозитивными опухолями прогноз заболе вания хуже, чем у пациентов с Снегативными новообразованиями (цит. по [6].

Показано наличие взаимосвязи между концент рацией С в сыворотке крови и развитием мета стазов, а также неблагоприятным течением заболе вания у больных раком грудной железы [15], яични ка [16], шейки матки [17], мелкоклеточным раком легкого [18], немелкоклеточным раком легкого [19], опухолями головы и шеи [20], светлоклеточным ра ком почки [21], остеосаркомой [22], раком пищевода [23], гепатоцеллюлярной карциномой [24], колоректальным раком [25], раком поджелудочной железы

  1. и раком желудка (Ж [6, 27–31]. В то же время данные о клиническом и прогностическом значении высокого уровня С в сыворотке крови больных с Ж несколько противоречивы, хотя есть инфор мация о том, что определение уровня С может быть полезно для клинического мониторинга.

    Цель исследования определение содержания

    С в сыворотке крови больных с Ж, установ ление его корреляции с клиническими характерис тиками процесса и оценка клинического значения этого показателя.

    ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

    Образцы крови больных брали после информи рования пациентов об исследовании и получения их согласия. В исследовании использован материал, полученный у пациентов с Ж, получавших лечение в Институте онкологии АМН Украины и Городской онкологической больнице Киева. Всего обследова но 138 больных (53 женщины и 85 мужчин, сред ний возраст пациентов составил 59,7 (31–80 года. По стадиям в соответствии с классификацией пациентов распределили таким образом: стадия 24 больных, 26, 57, – 31. Клиническая характеристика пациентов представлена в табл. 1.

    Периферическую венозную кровь брали ут

    ром (между 8.00 и 9.00 непосредственно перед операцией и помещали в стерильные пластиковые пробирки. Образцы крови подвергали коагуляции при комнатной температуре в течение 30 мин и по том центрифугировали при 3000 об./мин в течение 20 мин. Сыворотка сепарировалась, собиралась и со хранялась при –20 °С до анализа. Повторные забо ры крови брали на 10–12й и 30й день после опера ции. У некоторых больных заборы крови осуществ ляли через 6, 10 и 18 мес.

    Содержание С в сыворотке крови определя ли иммуноферментным методом с использованием поликлональных антител, полученных к ангиоген ному фактору, и оценкой интенсивности окраши вания на фотометре «ti («i, при длине волны 492 нм [32].

    Выживаемость больных определяли методом Kплана айера, различия между кривыми вы живаемости анализировали с помощью o тес та. Корреляционные связи оценивали помощью коэффициента Пирсона.

    РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

    Определили существенное различие между сред ними значениями уровня С в сыворотке кро ви доноров и больных с Ж: 59,5 ± 7,0 и 302,3 ± 27,8 нг/мл соответственно ( 0,001. В то же вре мя не отмечено различий между предоперацион ными уровнями С в сыворотке крови у паци ентов с Ж и клиникопатологическими показате лями (табл. 1. Отмечали тенденцию к повышению уровня С в сыворотке крови у больных с развитой стадией процесса и опухолями больших раз меров. Полученные результаты частично расходят ся с данными А. Kii и соавторов [28], ко торые показали наличие значительной корреляции между уровнем С в сыворотке крови и стадией опухолевого процесса, в частности наличием отда ленных метастазов, хотя с остальными показателя ми уровень С не коррелировал, как и в работе М. ht и соавторов [6].

    Таблица 1 Уровень ФРЭС в сыворотке крови и клинико-патологические ха-

    рактеристики больных с РЖ

    Клинико-патологические характеристикиКоличество больных (138)Уровень ФРЭС в сыворотке, нг/мл, (302, 3

    (232–414))

    Локализация опухоли
    Верхняя треть17309,5 (265–398)

    292,0 (240–408)

    300,7 (232–396)

    273,7 (240–345)

    Средняя треть39
    Нижняя треть73
    Тотальное поражение9
    Гистология
    Аденокарцинома97296,2 (232–408)

    292,5 (240–345)

    302,5 (257–378)

    313,2 (248–402)

    Слизистый рак7
    Перстневидноклеточный рак15
    Недифференцированный рак19
    Степень дифференцировки
    G15307,8 (245–359)

    282,1 (232–325)

    297,4 (240–383)

    306,6 (240–408)

    G221
    G332
    G444
    Стадия TNM
    I24298,4 (245–396)

    292,8 (240–402)

    306,8 (240–408)

    299,2 (240–414)

    II26
    III57
    IV31
    Опухоль (рТ)
    Т112301,2 (253–359)

    287,6 (232–396)

    301,3 (240–402)

    306,2 (240–414)

    Т221
    Т359
    Т446
    Лимфатические узлы
    N0

    N1-2

    62

    76

    293,4 (232–402)

    305,7 (240–414)

    Отдаленные метастазы
    Нет

    Есть

    117

    21

    298,7 (232–408)

    301,1 (240–414)

    Примечание: количество больных в разделе «Степень дифференцировки» составляет 102, что объясняется выполнением у 36 больных эксплоративных и симптоматических операций, при которых не выполнен полный объем гистологических исследований.

    Для определения эффекта хирургического вме шательства на уровень С в сыворотке крови, этот уровень измеряли перед операцией, на 10– 12й и 30й день после операции (всего таких боль ных 111. адикальная резекция, включавшая суб тотальную или тотальную гастрэктомию и удаление лимфатических узлов (2 выполнена 82 больным,

    у 56 пациентов выявлена нерезектабельная опухоль,

    что обусловило проведение этим пациентам пал лиативных, эксплоративных или симптоматичес ких операций. В группе радикально оперирован ных больных уровень С в сыворотке крови на 10–12й день после операции не изменялся и сни жался на 30й день ниже предоперационного уров ня в среднем на 20–35 нг/мл. У нерадикально про оперированных пациентов уровень С практи чески не изменялся.

     

    Таблица 2 Уровень ФРЭС в сыворотке крови и выживаемость больных с

    РЖ

    Уровень ФРЭС

    (нг/мл)

    Количество продолжающих жить больных/общее

    число больных

    Количество умерших/ общее число

    больных

    Медиана продолжительности жизни

    умерших (нед)

    ≥ 29032/59 (54,0%)27/59 (46,0%)33 (9–107)
    < 29039/57 (68,5%)18/57 (31,5%)28 (7–72)

    Примечание: учтены больные, доступные наблюдению (116 пациентов). По рекомендации М. ht и соавторов [6] все значения уровня С в сыворотке крови разде лены на две группы: высокого уровня, показатели которого выше медианы содержания С в сыво ротке крови (> 290,0 (232–414 нг/мл и низкого показатели ниже 290,0 (232–414 нг/мл (табл. 2. Установлено, что предоперационный уровень

    С в определенной мере влияет на исход лече ния, в частности это относится к количеству умер ших и продолжающих жить больных. При этом ме диана продолжительности жизни больных обеих групп оказалась практически одинакова.

    При анализе 82 радикально оперированных боль ных выявлено: 22 пациента (26,85% умерли за пери од 2–107 нед, из них 16 (72,7% в течение первого года после оперативного вмешательства, 5 (22,8% в течение 2го, и 1 (4,5% в течение 3го. Следует отметить, что не выявлена зависимость между пре доперационным уровнем С и выживаемос тью больных, подвергнутых радикальной опера ции: из пациентов с высоким уровнем С выше 290,0 нг/мл умерло 29%, с низким 25% (рисунок. Также не установлена связь предоперационного уровня С с выживаемостью пациентов, кото рым выполнены нерадикальные операции.

     

    image

     

    image image image image image

     

    image

    Рисунок. Общая выживаемость больных в зависимости от уровня С в сыворотке крови (р = 0,05

    Установлено, что повышение со временем уров ня С выше медианы может свидетельствовать о скрытом продолжении опухолевого процесса, в част ности рецидивировании. У больных, которым опре деляли уровень С через 6, 12 и 18 мес, этот по казатель выше медианы у 55% пациентов, из них у 65% отмечали пролонгацию опухолевого процесса в разные сроки наблюдения.

    М. ht и соавторы [6] сообщили, что при разде лении всей когорты значений уровня С на низкие и высокие (ниже и выше медианы не выявля ли корреляцию между продолжительностью безре цидивного периода с какимлибо уровнем С, но в группе больных с высоким уровнем С от мечена тенденция к более высокой частоте рециди вирования. Показано также, что высокий уровень

    С в периферической крови является независи мым прогностическим фактором, в частности фак тором риска развития метастазов [6, 27–31] и мо жет, по данным многофакторного анализа, предска зывать сниженную выживаемость [28], хотя уровни

    С в сыворотке крови не коррелировали ни с од ним из клиникопатологических показателей.

    ВЫВОДЫ

    1. Уровень С в сыворотке крови у больных с Ж значительно выше, чем у доноров.
    2. Не выявлена связь уровня С с клинико патологическими характеристиками опухолевого процесса.
    3. Уровень С выше медианы (> 290,0 нг/мл до операции может свидетельствовать о неблагопри ятном течении заболевания.
    4. Установлена определенная связь предопера ционного уровня С с выживаемостью больных, но она статистически недостоверна.
    5. Повышение уровня С в сыворотке кро ви больных после операции по отношению к после операционному уровню свидетельствует о реци дивировании и/или начале развития метастазов и может использоваться в качестве фактора мони торинга.

БЛАГОДАРНОСТЬ

Исследование выполнено при поддержке Про граммы Национальной академии наук Украины

«Особенности функционирования онкогенома (№ 0102003228.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ellis il . iоi d tti. J

1996; 32A: 2451–60.

2. Gaca G loy TD Gsch A et al. ioi o to itti to d thi tt – tt o ittio?

J 2004; 40: 1302–13.

3. Hanahan D olkman . Ptt d i h

i o th ioi ith di toii. 1996;

86: 353–64.

4. Toi atsumoto T Bano H. dothi oth

to: it ooti, diti, d thti iitio. Lt o 2001; 2: 667–73.

  1. Rinmuth N Paikh AA Ahma SA et al. Bioo o io

    i i to o th toitti tt. io R Th 2003; 60: 199–207.

  2. Ohta Konno H Tanaka T et al. Th iii o i

    ti dothi oth to ( oti i ti . Ltt 2003; 192: 215–25.

  3. Nakamua Y Yasuoka H Tsujimoto et al. Pooti i

    ii o dothi oth to i bt io

    ith ot oo. i R 2003; 9: 716–21.

     

  4. Yokoyama Y Chanock-ons DS icnc D et al.

dothi oth to i iddt ooti to i

ithi oi io. B J 2003; 88: 237–44.

9. Ua Tai Y Yamashita Y et al. otio bt

dothi oth to xio d iio ho t i i io. t J 2002; 98: 335–43.

10. Zhou Y-H Tan Hss KR Yung WKA. Th xio o PX6, PTN, dothi oth to, d id

oth to to i io. i R 2003; 9: 3369–75.

11. Bown Bs B ackman RW et al. d

xio o biit to ( dothi

oth to d it to i id d bdd io.

J Ptho 1993; 143: 1255–62.

12. Takahashi Y Kitaai Y Bucana CD et al. xio o

dothi oth to d it to, KR, o

t ith it, tti, d oitio o h o

o . R 1995; 55: 3964–8.

13. So Y Baba H ukua T et al. Hih xio o

dothi oth to i oitd ith i tti d

oo ooi o tit ith dt ti doio

. 2000; 88: 2239–45.

14. onvila C tgs P ust et al. 53 d

xio iddt dito o to d

i ooi ti tio o ti . B J

2004; 90: 206–15.

15. Сoaini D Boacchi P Daion G et al. otibtio o

dothi oth to to th Nottih ooti i dx i odti bt . B J 2001; 85: 795–7. 16. Hfl A Zilling R imm Ch et al. Poti

dothi oth to ooti t i oi . o o 2006; 103: 512–7.

  1. itsuhashi A Suzuka K Yamazawa K et al.

    dothi oth to ( d t

    o i tit ith i io. 2005;

    103: 724–30.

  2. Salvn P Ruotsalainn T attson K onsuu H. Hih

ttt o dothi oth to ( i oitd ith oo oto i

. t J 1998; 79: 144–6.

19. Tamua Ohta Y. dothi oth to i tit ith i o io.

2003; 98: 1217–22.

20. inta H iua K Ogino T et al. Pooti o

dothi oth to ( i hd d q

o io. B J 2000; 86: 775–81.

21. lman A Tamakin Paciotti G et al. d otti td d ot ith do thi oth to i tit ith t

. i R 2000; 6: 4628–34.

22. Kaya Waa T Kawaguchi S et al. d th

ti dothi oth to i tit ith

ii o otoo. B J 2002; 86: 864–9.

23. Shimaa Y Taka S Nabya H et al. ii iii

 

27. Kitamua Toi Aai K et al. ottio o

dothi oth to i th o ti tit.

o R 1998; 5: 1419–24.

  1. Kaayiannakis A Syigos KN Polychoniis A et al. i

    ti i th o ti tit. o

    tio ith thooi ib, tit i, d to

    . 2002; 236: 37–42.

  2. shikawa Kitayama Kazama S Nagawa H. xio o dothi oth to d ( d – i iott i to o hti tti i diti

    td ti io. J J i o 2003; 33: 21–7.

  3. Konno H Ohta Baba et al. Th o o iti

L8 d oti i th oio o ti .

i 2003; 94: 735–40.

31. Kim HK Song KS Pak YS et al. td o i

ti tt ioti, , L6 d RNT i tit ith ti : oib o o ttti dito.

J 2003; 39: 184–91.

32. Лісняк І.О. Неоваскуляризація і пухлинний ріст. Дис … дра біол наук, Київ, 2004; 280 с.

o dothi oth to i oh

qo io. 2001; 92: 663–9.

24. Poon RT-P au CP-Y Chung S-T et al. Qtitti o

tio o d to xio o doth

i oth to i tit ith hto io.

R 2003; 63: 3121–6.

25. D Vita Oitua ito E et al. td io ti dothi oth to i tit ith

oo io. 2004; 100: 270–8.

26. Kaayiannakis A Bolanaki H Syigos KN et al.

dothi oth to i ti tit ot ith dd d ttti di d oo

ooi. Ltt 2003; 194: 119–24.


Без комментариев » Добавить комментарий